jueves, 20 de abril de 2017

Preparación de Soluciones para SDS-PAGE para Proteínas

  • Calculamos la cantidad de SDS al 20% que necesitamos para el volumen deseado: 50mL 
  • Pesamos el SDS en un vaso de precipitado, después añadimos agua hasta 170mL 
  • Calentamos a 68ºC y agitamos con un agitador magnético.
  • Cuando esté disuelto lo enrasamos a 200mL.
  • Lo etiquetamos y lo guardamos a temperatura ambiente.
-TRIS-CIH 0.5M pH 6.8-200mL:
  • Calculamos la cantidad de Tris que necesitamos para preparar 200mL.
  • Pesamos el Tris en un vaso de precipitado, que hemos calculado que será: 12.11, añadimos hasta 170mL de agua destilada y agitamos con agitador magnético.
  • Medimos el pH, que efectivamente marca 6.8
  • Lo enrasamos a 200mL.
  • Lo etiquetamos y lo guardamos a temperatura ambiente.
-RUNNING BUFFER FOR PROTEINS 10X-1 LITRO:
  • Pesamos 27.26g de Tris y 144.86g de Glicina, junto con un volumen de de SDS 20% de 50mL 
  • Todo lo añadimos a un vaso de precipitados añadiendo agua hasta unos 900 mL y agitamos con un agitador magnético.
  • Medimos el pH que es 8.
  • Lo enrasamos hasta 1L con agua destilada.
  • Lo etiquetamos y guardamos a temperatura ambiente.
-RUNNING BUFFER FOR PROTEINS 1X-1 LITRO:
  • Preparamos un litro de Running Buffer 1X a partir de Running Buffer 10X.
  • Enrasamos en un matraz aforado hasta 1L con agua destilada.
  • Lo etiquetamos y guardamos a temperatura ambiente.
-TCA:
  • Pesamos 5g de TCA.
  • Lo enrasamos en un matraz aforado hasta 50mL con agua destilada.
  • Lo etiquetamos y guardamos a temperatura ambiente.
-LOADING BUFFER 5X FOR PROTEINS SAMPLE:
  • Pesamos la Glicina y medimos el











No hay comentarios:

Publicar un comentario